血液采集和血浆制备
在每个工作日开始时，采集健康受试者和口服抗凝剂治疗稳定的患者的血液。将通过在塑料（或玻璃硅化真空）管中进行清洁静脉穿刺来收集血液，该塑料管含有浓度在105-109 mmol/L范围内的柠檬酸三钠溶液（9体积的血液/1体积的柠檬酸钠抗凝剂）。导管必须倒置几次，以确保血液和抗凝剂完全混合。采集至少2500克柠檬化血液后，立即在受控室温下离心10分钟。贫血小板血浆被转移到塑料管中，并在室温下加盖储存，直到进行测试。
凝血活酶的制备
在每个工作日：在重构前，在室温下平衡适当数量的冻干rTF/16试剂安瓿（14/324）和提供的稀释剂（14/326）至少15分钟。在重构前，在室温下平衡适当数量的待校准的凝血活酶安瓿及其重构液（如有）至少15分钟。按照说明重新配制冻干rTF/16试剂安瓿（14/324）（见上文第6节和第7节）。按照说明重新配制需要校准的凝血活酶安瓿。在每个工作日结束时丢弃剩余的重组凝血活酶。
测试程序
NIBSC RTF/16重组人促凝血酶原激酶国际标准物质如果在10个工作会话中执行测试，则在每个会话中使用以下程序。根据下面给出的设计，用两种凝血活酶测试8个血浆样本（2个正常和6个口服抗凝治疗稳定的患者）。测试必须作为单一测定进行。使用rTF/16的校准必须仅通过手动（倾斜管）技术进行，而凝血仪可用于测试待校准的凝血活酶。使用倾斜管技术，试管必须尽可能深地浸入水中，以确保最佳的温度控制。每隔一段时间前后倾斜管子。为了避免长时间将水管从水中取出，建议使用照明水浴。检测正常血浆和患者血浆的顺序是随机的，如果这被认为是随机的话，则必须反映血液采集的顺序。例如，首先收集正常1例（将首先进行测试），然后收集口服抗凝剂治疗的6例患者，最后收集正常2例（将最后进行测试）。在任何情况下，检测顺序都不应与患者血浆凝固时间的延长有关。每个工作日的检测顺序如下：正常1名患者1名患者2名患者3名患者4名患者5名患者6名正常2如果在5个工作时段进行检测，则每个时段使用的样本数量为16个（4名正常和12名患者）。每个工作日的检测顺序如下：正常1、正常2、患者1-12、正常3、正常4如果两种血浆都使用手动技术，则在进行下一个工作日之前，应使用两种凝血活酶对每种血浆进行检测。如果要校准的凝血酶原时间系统涉及使用自动化仪器，那么在进行下一次之前用两种凝血活酶测试每种血浆是不现实的。在这种情况下，所有血浆都可以连续地用每种凝血活酶进行测试，或多或少同时用两种凝血活蛋白酶进行测试。应由同一专业操作员负责进行整个校准。
rTF/16的实际测试
将玻璃试管放入水浴中，等待至少5分钟，使温度达到37ºC。移取0.2 ml rTF/16，孵育2分钟至37ºC。用移液管移取0.1 ml未预热的试验血浆，并立即启动秒表。摇晃以混合内容物，并定期来回倾斜试管，直到形成凝块。以秒和1/10秒为单位记录凝固时间。
设备
NIBSC RTF/16重组人促凝血酶原激酶国际标准物质校准移液管，用于重建凝血活酶并输送凝血活酶和血浆样本进行实际测试。如果使用自动微量移液器，每次测试都必须更换尖端。带有非接触式塞子（无橡胶）的非接触管，用于储存血液和血浆。非接触式移液管，用于转移等离子体进行储存和分配等离子体进行测试。用于测试37°C+/-0.5秒表恒温水浴的玻璃管
统计分析和ISI测定
关于统计分析和ISI测定，请参考世界卫生组织用于控制口服抗凝治疗的凝血激酶和血浆指南（1）。这些要求可向世界卫生组织生物制品股索取，地址：瑞士日内瓦27号CH-1211。
标准物质保存在NIBSC的温度受控存储设施内，应按照标签上的指示在收到时进行存储。世界卫生组织的政策是不对其国际参考资料指定有效期。稳定性研究表明，这种材料在-20°C或更低的温度下储存时具有适当的稳定性，在材料取出或更换之前，指定值保持有效。这些研究还表明，该材料在使用冷却包装运时具有适当的稳定性，不会对指定值产生任何影响。鼓励有数据支持任何参考制剂特性恶化的用户联系NIBSC。
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本公司的优势品牌有：美国NIST标准品、英国NIBSC（WHO国际标准品）、日本药典JP、欧洲标准局ERM、Cerilliant、加拿大TRC、欧洲药典EP、英国药典BP、美国药典USP、欧洲标准局ERM、加拿大Wellington等。欢迎咨询订购。