冷冻人血清中同型半胱氨酸和叶酸标准品用途：应将待分析的SRM瓶从冰箱中取出，并在室温下放置，直到解冻。材料解冻至室温后，应立即使用。在取出等分试样之前，应轻轻地旋转材料使其混合。
冷冻人血清中同型半胱氨酸和叶酸标准品NIST SRM 1955材料来源：SRM1955冷冻人血清中的同型半胱氨酸和叶酸由阿尔托科学有限公司（加利福尼亚州卡尔斯巴德）制备。
材料的制备：该材料是从人血清主池中制备的。1级和2级材料中的分析物浓度未被强化。强化了3级材料中的分析物浓度。2级材料相当于人类血清主库。通过用pH 7.04的磷酸盐缓冲盐水溶液稀释2级材料来制备1级材料。通过向2级材料中加入适量的同型半胱氨酸和5-甲基四氢叶酸来制备3级材料。分析方法同型半胱氨酸
NIST SRM 1955测量：使用三种同位素稀释质谱法测量同型半胱氨酸[1,3,9]。对于LC/MS和大多数LC/MS/MS测量，分析了三个独立的集合。一套由三个级别中每一个级别的两个瓶子中的每个瓶子的两个测试部分组成。用已知量的内标同源半胱氨酸-d4掺入每个测试部分。在通过添加二硫苏糖醇（DTT）还原样品后，使用阴离子交换固相萃取进行样品净化。将提取的溶剂蒸发成由每个水平的一个小瓶中的两份等分试样组成，按照下述NIST 5MT方法3[3]制备用于LC/MS/MS测量，并使用上述MS/MS条件进行测量。对于使用GC/MS的测量，分析了三个独立的集合。一套由三个级别中每一个级别的两个瓶子中的每个瓶子的两个测试部分组成。每个测试部分都掺入已知量的内标高胱氨酸-d8。在氢氧化钠溶液中使用DTT破坏二硫键并释放同型半胱氨酸和同型半胱氨酸-d4，然后通过在阴离子交换树脂上吸收分离，然后进行洗脱、浓缩、用N-甲基-N-（叔丁基二甲基甲硅烷基）-三氟乙酰胺（MTBSTFA）衍生化和具有选择性离子监测的GC/MS。使用具有两个不同的30米毛细管柱（一个具有5%（摩尔分数）苯基甲基聚硅氧烷固定相，另一个具有50%苯基甲基聚硅氧烷）的质量选择性检测器进行GC/MS测量。监测两对不同的离子（m/z 420/424和m/z 318/322）。
美国疾病控制与预防中心的同型半胱氨酸测量：美国疾病控制和预防中心使用了两种方法来测量同型半胱氨酸。这些数据不是用来计算认证值的，而是用来证明这种SRM对于测定同型半胱氨酸的常规方法的可转换性。对于第一种方法[10]，在用三（2-羧乙基）膦（TCEP）将蛋白质结合和氧化的硫醇（二硫化物和混合二硫化物）还原为游离硫醇、用三氯乙酸沉淀蛋白质以及用7-氟苯-2-氧杂-1，3-二唑-4-磺酸铵（SBD-F）进行荧光衍生后，通过等度液相色谱法和荧光检测（LC-FD）在385 nm激发和515 nm发射下测量总同型半胱氨酸（tHCY）。使用pH为5.5的乙酸盐流动相，在7分钟内等比例分离得到的硫醇衍生物。胱胺用作内标。通过峰面积比（分析物与内标物）进行定量，并基于血清基质中的三点标准曲线。对于第二种方法[11]，通过使用Abbott Diagnostics的自动荧光偏振免疫测定法（FPIA）测量tHCY。简而言之，DTT将与白蛋白和其他小分子（同型半胱氨酸和混合二硫化物）结合的同型半胱氨酸减少为游离硫醇。S-腺苷-半胱氨酸（SAH）水解酶在添加腺苷的存在下催化同型半胱氨酸转化为SAH。在随后的步骤中，特异性单克隆抗体和荧光化SAH类似物示踪剂构成FPIA检测系统。通过Abbott AxSym使用机器存储的校准曲线计算血清tHCY浓度。
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