AOCS 1116-A Ms11转基因油菜叶组织DNA标准品材料与方法
BASF Agricultural Solutions Seed US LLC通过从植物中提取源叶材料来制备散装材料,这些植物已经使用多种质量标准进行了单独测试,并且是从本身通过相同标准的植物中收获的种子中生长出来的。不符合质量标准的植物被移除并销毁。从符合质量标准的植物中收获叶子材料,立即冷冻并储存在-70℃下。根据基于CTAB的方案(Doyle JJ和Doyle JL,1987)从一种或多种植物的叶子中提取基因组DNA。通过1.0%琼脂糖凝胶电泳和溴化乙锭染色确定基因组DNA的完整性和浓度,并通过数字成像定量与λ分子量标准进行比较。浓度测量一式三份,在三种不同的凝胶中重复进行。没有明显的物理降解迹象,DNA在高于40Kb的位置迁移。AOCS 1116-A
巴斯夫农业解决方案种子美国有限责任公司向AOCS交付了Ms11油菜籽。从复合物中制备了五(5)个DNA工作样本,每个样本10μg,并送往洛杉矶新奥尔良的Eurofins GeneScan(ISO 17025认证的实验室)进行特定事件的定性PCR分析,以筛查是否存在预期事件Ms11。该测试用于确认是否存在以及同质性。
在路易斯安那州新奥尔良的Eurofins GeneScan(ISO 17025认证的实验室)使用PCR协议显示,用于制造Ms11材料的叶子含有Ms11事件。Ms11油菜叶片DNA由SGS Midwest Seed Services包装在无菌、0.5ml带踢脚的螺旋盖自封管中,每10μg一份。
Ms11转基因油菜叶组织DNA使用Microsoft Excel的随机数生成器功能来选择样本,以验证基因的存在、同质性,并排除包装过程中的降解。样本编号AOCS 1116-A:44、201、38、126和165被送往洛杉矶新奥尔良的EurofinsGeneScan(ISO 17025认证的实验室)进行事件特异性定性PCR分析,以筛查样本中Ms11的存在。

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