AOCS 0711-C3, Rf2油菜叶片组织基因组DNA标准品效期更新
Rf2油菜叶片组织基因组DNA标准品材料与方法
巴斯夫农业解决方案种子美国有限责任公司通过从使用多种质量标准单独测试的植物中提取源叶材料来制备散装材料，这些植物是从本身通过相同标准的植物中收获的种子中生长出来的。不符合质量标准的植物被移除并销毁。从符合质量标准的植物中收获叶子材料，立即冷冻并储存在-70°C下。根据基于CTAB的方案（Doyle JJ和Doyle JL，1987）从一种或多种植物的叶子中提取基因组DNA。通过溴化乙锭染色的1%琼脂糖凝胶电泳确定基因组DNA的完整性和浓度，并通过数字成像定量与λ分子量标准进行比较。浓度测量一式三份，在三种不同的凝胶中重复进行。没有明显的物理降解迹象，DNA在高于40Kb的位置迁移。
巴斯夫农业解决方案种子美国有限责任公司向AOCS交付了2毫克Rf2油菜籽。从复合物中制备五（5）个DNA工作样本，每个样本10μg，并送往洛杉矶新奥尔良Eurofins GeneScan（ISO 17025认证实验室）进行事件特异性定性PCR分析，以筛查预期事件Rf2的存在。该测试用于确认是否存在以及同质性。根据巴斯夫农业解决方案种子美国有限责任公司的PCR协议，用于制造Rf2材料的叶子被证明含有Rf2事件。SGS中西部种子服务公司将Rf2油菜叶子DNA包装在无菌、0.5ml带踢脚的螺旋盖自封管中，每10μg一份。AOCS使用Microsoft Excel的随机数生成器功能来选择样本，以验证基因的存在、同质性，并排除包装过程中的降解。样品编号AOCS 0711-C3:55、139、163、171和187被送往洛杉矶新奥尔良Eurofins GeneScan（ISO 17025认证实验室）进行事件特异性定性PCR分析，以筛查样品中Rf2的存在。
AOCS 0711-C3稳定性
这些CRM的稳定性已列为自推出之日起1年。这些材料被密封并储存在4°C的黑暗中，因此不会暴露在空气中，预计其稳定性会超过估计的有效期。每年将重新评估叶DNA提取材料的稳定性。如果样本仍然检测出该性状的存在呈阳性，则证书将延期。
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