冷冻人产前血清标准品NIST SRM 1949储存条件：血清冷冻运输（在干冰上），收到后应冷冻储存，直到可以使用。冷冻柜温度为-20°C，可储存长达一周。如果预计储存时间更长，材料应储存在–80°C或以下。SRM不应暴露在阳光或紫外线辐射下。在室温或冰箱温度下储存解冻的材料可能会导致激素浓度的变化。材料在–80°C下保存，以便在NIST长期储存。在这些条件下，激素预计是稳定的。
处理和使用：SRM 1949作为冷冻血清提供，应允许其在室温下在弱光下解冻至少30分钟。材料平衡到室温后，应立即使用。在取出测试部分进行分析之前，应轻轻混合小瓶中的内容物。应采取预防措施，避免在搬运和使用过程中暴露在阳光或紫外线辐射下。
冷冻人产前血清标准品来源和准备：NIST SRM 1949是在NIST对人体受试者进行适当研究后开发的。该SRM由Equitech-Bio股份有限公司（德克萨斯州克尔维尔）收集的母体血清池制备。血清包括四种类型：来自三个妊娠期每一个妊娠期的捐献者的血清和育龄期的非妊娠捐献者的血清。三个月的采集定义如下：妊娠早期，妊娠6至10周，妊娠中期，妊娠18至21周，妊娠晚期，妊娠32至35周。血清在干冰上冷冻运输到美国疾病控制与预防中心进行处理，在那里在100级洁净室中制备池。预期接触血清的材料，包括容器、分配器和冷冻瓶，都经过了预筛选，以确保适用于痕量金属分析。将血清（16个单位，每个约500 mL，4个单位/池）解冻，并在4°C的章动混合器上匀浆。冷血清单位通过无菌纱布垫过滤以去除悬浮物质，并合并到适当的池中。然后使池平衡到室温。然后使用自动分配器系统将血清分配到冷冻小瓶中，并使用磁力搅拌板对血清进行连续均匀化。冷冻小瓶立即加盖并储存在大约–70°C的温度下。
甲状腺素、三碘甲腺原氨酸和反三碘甲甲状腺原氨酸（NIST）的测定分析方法：使用基于NIST LC-MS/MS参考方法的分析方法[5，6]，通过液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）测定总甲状腺素（T4）、总三碘甲状腺原氨酰（T3）和总反三碘甲状腺氨酰（rT3）。SRM 1949的样品在–80°C下从仓库中取出，并在避光的情况下平衡至室温2小时。用标记的内标物（T4-13C6、T3-13C6和rT3-13C6）的混合物对0.5g的样品等分试样进行重量加标，用0.4mL去离子水稀释，并在室温下平衡1小时，同时避光。平衡后，向样品中加入70μL 25%氢氧化铵（体积分数）。然后使用固相萃取（SPE）Oasis MAX滤筒（Waters，Milford，MA）提取碱性样品，该滤筒已用7mL甲醇和7mL去离子水预处理。装载样品，收集流出物，并重新装载以最大限度地结合分析物。然后用3 mL在去离子水中的2%氢氧化铵（体积分数）和3 mL甲醇洗涤滤筒。然后使用含有0.05%盐酸（体积分数）的7mL甲醇从试剂盒中洗脱被测物。将提取物在40°C的氮气下蒸发至干，在100μL甲醇、水和甲酸混合物（50:50:0.025，体积分数）中重构，并转移到琥珀色自动进样瓶中的玻璃插入物中，用于注射到LC-MS/MS上。使用与安捷伦1100系列LC耦合的AB Sciex API 4000 LC-MS/MS系统进行分析。使用Agilent Eclipse C18 Plus柱（2.1 mm x 150 mm，5μm粒径）进行分离。使用甲醇和去离子水（体积分数60:40）与0.5%甲酸的等度流动相，流速为200μL/min，持续10分钟。正模式下的电喷雾电离用于每种分析物的定量和定性转变的多重反应监测（MRM）。使用每种分析物的独立校准曲线对样品进行量化，以消除交叉污染的可能性。使用定量1H核磁共振波谱（1H-qNMR）程序测定校准品的化学质量纯度。
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