AOCS 0711-B3, Rf1 canola leaf tissue genomic DNA源叶材料取自使用多种质量标准单独测试的植物,并从本身通过相同标准的植物中收获的种子中生长。不符合质量标准的植物被移除并销毁。从符合质量标准的植物中收获叶子材料,并立即冷冻,储存在-70°C下。根据基于CTAB的方案(Doyle JJ和Doyle JL,1987)从一种或多种植物的叶子中提取基因组DNA。通过1.0%琼脂糖凝胶电泳和溴化乙锭染色确定基因组DNA的完整性和浓度,并通过数字成像定量与λ分子量标准进行比较。浓度测量一式三份,在三种不同的凝胶中重复进行。没有明显的物理降解迹象,DNA在高于40Kb的位置迁移。转基因油菜Rf1叶组织DNA标准品

用于制造 Rf1 canola leaf tissue genomic DNA材料的叶子被证明含有Rf1事件以及该事件的纯合性;在BASF Agricultural Solutions Seed US LLC使用PCR方案检测到P35S、BXN、2mEPSPS、cp4EPSPS、cp4EPSPS,NPTII、Barstar和PAT序列缺失。Rf1油菜叶DNA由SGS Midwest Seed Services包装在无菌、0.5ml带踢脚的螺旋盖自封管中,每10μg一份。
AOCS使用Microsoft Excel的随机数生成器功能来选择样本,以验证纯度和均匀性。样品编号AOCS 0711-B3:25、58、98、140和207被送往洛杉矶新奥尔良Eurofins GeneScan(ISO 17025认证实验室)进行事件特异性定性PCR分析,以筛查样品中Rf1的存在。
Rf1油菜叶片组织基因组DNA标准品稳定性
这些CRM的稳定性已列为自认证之日起1年。这些材料是密封的,并在冷藏条件下储存,因此不会暴露在空气中,预计其稳定性会超过估计的保质期。每年将重新评估叶DNA提取材料的稳定性。如果样品仍然代表认证值,则证书将延期。
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