NIST SRM 1957冻干非强化人体血清中的有机污染物标准品

NIST SRM 1957稳定性和储存：血清经过冷冻干燥，应在2°C至8°C的冰箱中储存，直至可供使用。它不应被冷冻或暴露在阳光或紫外线辐射下。重建后，应立即使用内容物，或将其储存在2°C至8°C之间，直到可以使用为止，最好在4小时内。不建议冷冻重建材料。

使用：将小瓶升至室温，取下金属盖，轻轻拍打小瓶底部，将任何干燥的血清颗粒从塞子中取出。小心地取下塞子，以避免血清颗粒可能丢失。使用已知精度的分配器在20°C至25°C的温度下缓慢向小瓶侧面添加10.7 mL蒸馏水或HPLC级水，同时不断转动小瓶。更换塞子，将小瓶旋转两到三次，静置约10分钟。通过轻轻旋转混合内容物，静置大约30分钟，再次旋转，静置10分钟，最后将小瓶倒置几次。不要用力摇晃，否则会产生泡沫。重建的总时间约为1小时。重建后，尽快使用内容物，或在2°C至8°C之间储存，直到分析，最好在4小时内。

非强化人体血清中的有机污染物标准参考物质材料来源：血浆取自美国各地的各个血库：北卡罗来纳州的威尔明顿和格林维尔；佛罗里达州杰克逊维尔和奥兰多；阿拉斯加州琼斯博罗；亚利桑那州弗拉格斯塔夫；盖洛普和阿尔伯克基，新墨西哥州；田纳西州孟菲斯；缅因州波特兰市；和伊利诺伊州卡本代尔。

人血清中的多氯联苯（PCB）同系物、氯化农药和多溴二苯醚（PBDE）同系物标准物质材料的制备：血清的制备由Aalto Scientific，有限公司，Carlsbad，CA进行。在纤维蛋白沉淀和过滤后，将血清合并（总共约200 L）并储存在4°C下。为了生产1957年和1958年的SRM，该水池被一分为二。使用校准的自动移液管，将10.7 mL等分血清分配到30 mL琥珀色玻璃瓶中。样品被冻干，并且当达到稳定的真空度和温度时被认为是干燥的。

冻干非强化人体血清中的有机污染物标准品使用的分析方法

对于NIST方法1，通过添加10.7mL（质量已知）HPLC级水，对10个小瓶中的每个小瓶中的冻干血清进行重构。将已知量的内标溶液（包含选定的13C-标记的PCB同源物、选定的13C标记的杀虫剂、13C-标记多溴二苯醚209、氟化多溴二联苯醚47、PCB 103和PCB 198）添加到每个小瓶中，将其超声处理15分钟，并使其在冷藏下平衡过夜。将样品从冰箱中取出并使其达到环境温度后，加入10mL甲酸作为变性剂，然后立即加入10mL正己烷和甲基的1:1（体积分数）混合物C离心以获得尖锐的相边界，将上层有机相转移到浓缩容器中。每次用10mL正己烷重复提取两次。使用自动蒸发系统将合并的己烷层浓缩至约4 mL。将约2 mL浓硫酸加入到具有旋流的浓缩容器中。相分离后，除去己烷相，并使用4mL份的正己烷洗涤硫酸相两次。将合并的己烷相浓缩至约0.5mL，用于二氧化硅固相萃取（SPE）净化。用15mL在己烷中的10%（体积分数）二氯甲烷洗脱感兴趣的级分。使用在电子冲击（EI）和负离子化学电离（NICI）模式下操作的气相色谱/质谱（GC/MS）对浓缩样品进行分析。含有非极性专有相（DB-XLB，安捷伦技术公司，德国威尔明顿）0.25µm膜厚的0.25 mm×60 m熔融二氧化硅毛细管柱用于EI分析（NIST方法1a），而含有50%（摩尔分数）苯基取代的甲基聚硅氧烷相（DB-17MS，安捷伦特技术公司）的0.25 mm？0 m熔融二氧化硅毛细柱用于NICI分析（NIST法1b）。所有注射均为1µL，使用柱上入口。

对于NIST方法2，通过添加10.7mL（质量已知）HPLC级水，对六个小瓶中的每个小瓶中的冻干血清进行重构。将已知量的内标溶液（包含选定的13C-标记的多氯联苯同系物、选定的13C标记的农药、13C-标记多溴二苯醚209和选定的氟化多溴二联苯同系物）添加到来自每个小瓶的2g血清子样品中，涡旋，并在冷藏下平衡过夜。将样品从冰箱中取出并使其达到环境温度后，加入2mL甲酸，然后加入3mL在己烷中的20%（体积分数）二氯甲烷。使用聚焦微波提取法提取样品。提取后，离心样品，除去有机相，再加入3mL的20%（体积分数）二氯甲烷的己烷溶液。重复提取，并合并有机相。在用溶剂交换为异辛烷进行浓缩后，在硫酸-二氧化硅柱上清洗样品，然后在氧化铝柱上清洗（5%失活）。将来自净化柱的洗脱液浓缩至0.2mL，将溶剂改为异辛烷进行分析。使用GC/MS在EI模式（NIST方法2a）下分析浓缩样品，使用0.18mm×30m的熔融二氧化硅毛细管柱，该毛细管柱含有5%（摩尔分数）苯基取代的甲基聚硅氧烷相（DB-5MS，安捷伦技术公司）0.18µm的膜厚。所有注射均为20µL，使用可编程温度蒸发（PTV）入口。对于NIST方法2b，相同的提取物、相同的柱和PTV入口与NICI模式下的GC/MS一起使用。对于NIST方法2c，通过GC/MS在NICI模式下分析相同的提取物，使用柱上注射到含有5%（摩尔分数）苯基取代的甲基聚硅氧烷相（DB-5MS，Agilent Technologies）的0.18 mm×10 m熔融二氧化硅毛细管柱中，膜厚0.18µm。

对于NIST方法3，通过添加10.7mL（质量已知）HPLC级水，对六个瓶子中的每个瓶子中的冻干血清进行重构。将已知量的内标溶液（含有选定的13C-标记的羟基化化合物）加入到每个小瓶中，涡旋，并在冷藏下平衡过夜。将样品从冰箱中取出并使其达到环境温度后，向血清样品中加入2mL甲酸和0.5mL 6mol/L盐酸（HCl），然后加入2mL 20%（体积分数）二氯甲烷的己烷溶液。使用聚焦微波提取法提取样品。在提取过程中，离心样品，去除有机相，再加入3 mL 20%（体积分数）二氯甲烷的己烷溶液。重复提取，并合并有机相。然后将氢氧化钾（KOH）加入到有机相中。将样品振荡提取15分钟并离心，并去除KOH。该步骤重复两次，KOH相合并。将HCl（6mol/L）加入到KOH相中，随后加入2mL 20%（体积分数）二氯甲烷的己烷溶液。除去己烷相，并将该步骤重复两次，合并己烷相。使用硅胶柱进行净化，然后使用液相色谱法和三重四极质谱仪（LC/MS/MS）进行分析，使用C18柱（Agilent Eclipse Plus C18，3.0 mm×150 mm×3.5μm，Agilent Technologies）和甲醇-水梯度。