NIBSC06/202人乳头瘤病毒16型DNA国际标准品HPV16

单位数HPV16脱氧核糖核酸的第一个国际标准（NIBSC代码06/202）已被指定为每安瓿5 x 10^6国际单位（IU）。

人乳头瘤病毒16型DNA国际标准品HPV16可追溯性声明：2008年1月世界卫生组织会议提出（世界卫生组织会议报告，2008年），HPV16 DNA国际标准的使用说明包括用于确定制定该国际标准所用散装材料的理论HPV16 qenome当量（GEq）的计算和假设，从而证明1 IU相当于1 GEq。因此，世界卫生组织第一个HPV16 DNA国际标准的最终单位仍然是IU，而可追溯性声明允许用户将IU等同于GEq。在新墨西哥大学（UNM）Cosette Wheeler博士的实验室中进行重组HPV16质粒储备制剂的DNA浓度测定。通过在260nm处的吸光度以及使用Picogreen测定法（Invitrogen Corporation，USA）的荧光分光光度法测定DNA浓度。在两次DNA测量之间获得0.95或更高的相关系数。将10ng HPV16质粒DNA/μl提供给NIBSC以配制用于随后冷冻干燥的散装材料。UNM实验室还向NIBSC提供了一份声明，表明HPV16的1.0 x 1011 GEq/ml等于1.17 ng/μl。因此，10 ng HPV-16质粒DNA/μl质粒储备制剂相当于8.547 x 1011 HPV-16 GEq/ml。

NIBSC在制定第一个HPV16型DNA国际标准时使用了这些数据。第一个HPV16型DNA国际标准（NIBSC代码06/202）的散装材料的配方：在NIBSC，根据以下公式制备散装HPV16质粒DNA材料：散装材料的HPV-GEq/ml=（质粒库存的HPV-GEq/ml×质粒库存的体积）/散装材料的体积。因此，HPV16 GEq/ml散装材料=（8.547 x 10 11 HPV-16 GEq/ml质粒储备）x（0.02223 ml HPV-16质粒储备）/1900 ml HPV-1 6散装材料=1.0 x 107 HPV-16 GEq/ml散装物质。随后将HPV-16 DNA散装材料冷冻干燥在0.5 ml等分试样中。对于HPV16 DNA的第一个国际标准，将IU等同于GEq需要某些假设：1）HPV16的1.0 x 1011 GEq/ml等于1.17 ng/μl。2） 冷冻干燥时HPV16 DNA的活性没有损失。3） 重组HPV-16质粒DNA准确地模拟生物样品中HPV16病毒DNA的活性。独立计算重组HPV-16质粒DNA的GEq/ml。NIBSC还使用BioEdit sequence Alignment Editor v7.0.5.3（Tom Hall，Isis Pharmaceuticals股份有限公司，USA）独立计算了HPV16质粒储备制剂和批量制剂的基因组当量，其中全长HPV16基因组和pBR322 DNA的分子量基于序列内容。用于测定分子量的序列是pBR322的GenBank登录号J01749.1和HPV16的参考序列（登录号K02718）。

NIBSC06/202 生物材料来源国：英国。第2页，共3页每个安瓿在10mM Tris缓冲液（pH7.4）中含有0.5 ml HPV16质粒DNA的冻干当量，该缓冲液含有1mM EDTA、5 mg/ml海藻糖和来源于C33a细胞的~1 x 106人GEq/ml。

储存安瓿应在收到时储存在-20°C或更低的温度下。请注意：由于冻干材料的固有稳定性，NIBSC可能会在环境温度下运输这些材料。