BCR-393冷冻人血清中载脂蛋白A-I标准物质APOA1

人血清中载脂蛋白AI标准物质ApoA-I稳定性–研究加速热降解研究旨在评估冻干参考材料在储存寿命和运输过程中的稳定性。使用的程序是Tydeman和Kirkwood（12.8）所述的程序。参与这些研究的所有三个实验室都表明，在20°С至+56°C的温度下储存的效果是一致的。采用了各种检测方法，涉及不同的免疫反应，以尽可能多地检测降解过程。通过动力学免疫比浊法、终点免疫比浊术、终点激光浊度法、单克隆抗体或多克隆抗体夹心ELISA、浊度法、放射免疫测定法（RIA）和放射免疫扩散法测定Apo-AI浓度。由于两种ELISA方法的重复性不足，因此无法使用这两种方法获得的结果：经常观察到从同一样本中获得的两种结果之间存在10%的差异。对于载脂蛋白AII浓度，使用了四种方法：终点免疫比浊法、免疫浊度法、RIA和ELISA。在与apo AI相同的基础上，没有考虑最后两种方法获得的结果。所有可接受的结果都以图形形式显示在下文中。

BCR-393在高温（+20°C、+37°C、+45°C、+56°C）下储存的样品所获得的数据表示为含量损失相对于在-20°C下储存相同时间并在同一场合测定的样品的百分比。由于认证结果预计在±5%的不确定性区间内，因此这些限值已绘制在稳定性研究图上。

冷冻人血清中载脂蛋白A-I标准物质APOA1同质性–研究通过选择代表填充顺序的安瓿并通过三种独立方法评估其蛋白质含量（280 nm处的吸光度（为了将吸光度测量数据转换为相应蛋白质的质量浓度，分别使用apoAI和apoAII的1.14 m2 x kg-1和0.76 m2 x kg-1的吸收系数）来测试大批量冻干apo AI和apo AII的同质性；福林酚比色法；苯丙氨酸的HPLC分析）。由于参与该计划的两个实验室都发现了类似的结果，因此这里只提供了一个实验室的代表性数据。在这种情况下，选择了30安瓿用于载脂蛋白AI，27安瓿用于载载脂蛋白AII。原始分析结果如表6所示，其统计评估如表7（apo AI）和表8（apo AII）所示。没有尝试在方法之间进行校准。

人载脂蛋白A-I标准品ApoA I净化和认证计划由欧洲共同体委员会（CEC）的共同体参考局（BCR）组织。来自成员国的一些专家实验室应邀参加了会议，美国西雅图西北脂质研究中心也进行了合作。在主要项目开始之前，1986年至1988年期间进行了一系列可行性研究，以确定纯化载脂蛋白AI和AII的最合适方法，并评估纯化蛋白作为测定标准化参考物质的效用。附录中介绍了这些研究的行为和结果。从他们那里获得的经验导致了大批量纯载脂蛋白AI和AII的制备和质量评估，这些载脂蛋白在N2气体下等分、冻干并密封在全玻璃安瓿中。将两种纯化的载脂蛋白（AI和AII）的样品提交给6个欧洲实验室，通过氨基酸分析对其各自的质量浓度进行认证。最终认证于1990年完成，基于这些研究的结果。