| 名称 | Genetic Reference Panel, for the quantitation of BCR-ABL translocation by RQ-PCR (1st I.S.) /RQ-PCR定量BCRABL易位遗传标准品组/RQ-PCR定量BCR-ABL易位国际标准物质 |
| 货号 | 09/138 NIBSC09/138 WHO09/138 WHO标准品 |
| 类别 | 诊断基因组参考资料 |
| 关键字 | CML MRD定量BCR-ABL RQ-PCR冷冻干燥细胞费城染色体慢性粒细胞性白血病白血病基因组遗传DNA |
| 级别 | 国际标准 |
| 证书类型 | 分发仅限于校准二级标准品的实验室或提供商用试剂盒的实验室。不用于校准内部分析，仅供本地使用。为了避免失望，您可能希望在下订单前与我们联系jennifer.boyle@nibsc.org包括在环境温度下运输的与国际规模（IS）相关的不同BCR-ABL/对照基因（ABL、BCR和GUSB）值的材料 |
| 最小订购量 | 09-138.pdf使用说明 |
NIBSC09/138注意事项 此制剂不适用于人类或人类食物链中的动物。这些制剂含有人类来源的物质。通过聚合酶链式反应检测了HIV、HBV、HCV、CMV、EBV、HTLV-I/II、HHV-8和支原体，均未检测到。对游离干燥材料进行的常规微生物学测试显示，其受到溶血性葡萄球菌的污染，属于危险组2。在NIBSC进行的实验表明，该生物体在暴露于Trizol（30-60%苯酚）后被完全杀死，Trizol是RNA提取过程的第一步。与所有生物来源的材料一样，这种制剂应被视为对健康有潜在危害。应根据您自己实验室的安全程序使用和丢弃它。此类安全程序应包括佩戴防护手套和避免产生气溶胶。打开安瓿或小瓶时应小心，避免割伤。
在一项涉及10个实验室的国际合作研究中对该小组进行了测试，使用三种最常用的对照基因获得了4种主要标准品中每种标准品的BCR-ABL1IS平均值。
生物材料原产国：德国和英国。安瓿含有不同比例的冻干K562细胞（表达BCR-ABL1易位e14a2，也称为b3a2）和HL60细胞（BCR-ABL阴性）。每安瓿的细胞总数约为1.5 x 10e6。在冷冻干燥之前，将细胞悬浮在2x PBS中。下表显示了每种材料的估计RNA产量。请注意，这些值仅供参考，不用于正式使用
储存将所有未开封的安瓿储存在-20°C或以下。请注意：由于冻干材料的固有稳定性，NIBSC可能会在环境温度下运输这些材料。
打开DIN安瓿的方向有一个“易于打开”的彩色应力点，狭窄的安瓿杆与较宽的安瓿体相连。市面上有各种类型的安瓿破胶剂。要打开安瓿，轻轻敲击安瓿以收集底部（贴有标签）的材料，并遵循安瓿破碎机提供的制造商说明。
RQ-PCR定量BCR-ABL易位国际标准物质材料的使用 在重构之前，不应试图称量冷冻干燥材料的任何部分。在继续之前，请阅读第3-5页上的建议化验和二级标准校准方法。如果您正在校准二级标准品，请提取RNA，制备cDNA，并在作为一级标准品的同时测试该cDNA。这将使您能够确定二级标准的IS值。
a.按照上文第6节所述打开安瓿。
b.在室温下用1ml Trizol、600µl RLT缓冲液或其他RNA提取系统的等效物重新配制每种冻干材料。
c.用移液管尖端或针头重复抽吸，确保所有细胞裂解。培养5分钟。
d.将每个安瓿的全部内容物转移到无核酸酶管中。
e.使用您常用的方法从4种材料中提取RNA。
f.使用您常用的方法为4种RNA材料中的每种材料制备cDNA。（如果按照建议的方法，从每种RNA材料中制备2批cDNA；见第3页）。
g.使用您常用的方法测定cDNA材料的%BCR-ABL1/对照基因值。
h.通过分析这些材料的观察值与预期值，确定BCR-ABL1测定的校正系数，以报告IS。
稳定性参考材料存放在NIBSC的有保证的温度控制的储存设施内，应在收到时按照标签上的指示进行储存。世界卫生组织的政策是不对其国际参考资料指定有效期。加速降解研究表明，这种材料在-20ºC或更低的温度下储存时具有适当的稳定性，在材料被取出或更换之前，指定值保持有效。这些研究还表明，该材料在环境温度下运输时具有适当的稳定性，不会对指定值产生任何影响。鼓励有数据支持任何参考制剂特性恶化的用户联系NIBSC。
